teknova培養(yǎng)基滅菌效果下降的6大因素分析

　　teknova培養(yǎng)基是結(jié)合解剖，生物化學(xué)和免疫學(xué)方法鑒定組織切片中特異性抗原-抗體相互作用的技術(shù)，以各種格式使用，但所有方法都涉及兩個(gè)步驟：樣品制備和標(biāo)簽。

　　培養(yǎng)基用于基礎(chǔ)研究，以了解生物組織不同部位細(xì)胞標(biāo)志物和差異表達(dá)蛋白質(zhì)的分布，用于異常細(xì)胞的染色，如在癌性腫瘤中，細(xì)胞增殖和細(xì)胞死亡（凋亡和壞死）的特異性標(biāo)志物的染色。

　　樣品制備對于抗體-抗原相互作用的可視化至關(guān)重要，保持細(xì)胞形態(tài)，包括下面的組織結(jié)構(gòu)并且還維持靶抗原的表位的方式來制備樣品。固定用于保存組織，常見的試劑包括甲醛，多聚甲醛和戊二醛，它們都在不同程度上作用于蛋白質(zhì)中的可逆交聯(lián)共價(jià)鍵，但是這種固定有時(shí)會導(dǎo)致表位的掩蔽。因此，固定方案基于用于檢測的組織和抗體進(jìn)行實(shí)驗(yàn)確定和優(yōu)化。

　　造成teknova培養(yǎng)基滅菌效果下降的6大因素分析：

　　影響培養(yǎng)基滅菌效果的因素除滅菌溫度和時(shí)間外還有培養(yǎng)基的成分和物理狀態(tài)、PH、微生物數(shù)量、微生物細(xì)胞含水量、微生物細(xì)胞菌齡和耐熱性、蒸汽中空氣的排除情況、攪拌和泡沫等。

　　1、營養(yǎng)成分的保持：濕熱滅菌時(shí)，微生物被殺死的同時(shí)，培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分也遭到了一定的破壞，特別是氨基酸和維生素。如在121℃，僅20min，就有59%的賴氨酸及其他堿性氨基酸被破壞，蛋氨酸也有相當(dāng)數(shù)量被破壞。在熱的作用下某些營養(yǎng)成分還可能因受熱而相互之間發(fā)生反應(yīng)，造成培養(yǎng)基中原有營養(yǎng)成分的數(shù)量變化，因而影響培養(yǎng)基質(zhì)量。

　　2、微生物的耐熱性：細(xì)菌芽孢的熱阻較大，滅菌所需要的時(shí)間取決于把細(xì)菌芽孢減少到所規(guī)定數(shù)目的時(shí)間。

　　3、pH值：對微生物的耐熱性影響很大。

　　4、培養(yǎng)基成分：油脂、糖類及蛋白質(zhì)等組成的高濃度有機(jī)物會包于細(xì)胞的周圍形式一層薄膜、影響熱的傳導(dǎo)。而高濃度的鹽類、色素則削弱其耐熱性，滅菌較易。

　　5、泡沫：泡沫中的空氣形成隔熱層，使熱量難以滲透進(jìn)去，殺死其中的雜菌。

　　6、顆粒：顆粒小，容易滅菌，顆粒大，則難滅菌。